广东省高致病性猪蓝耳病流行病学调查

洪伟彬 李永福 叶毅飞 黄炳炽 黄世品
东莞市动物疫病预防控制中心

    据农业部通报， 2006 年 6 月份， 全国共有 12 个省份暴发“高致病性猪蓝耳病(HP － PＲＲS)” 疫情28 次， 因 “高致病性猪蓝耳病” 发病生猪 379． 8 万头，死亡 99． 2 万头;2007 年， 有 26 个省份的 310 个县市发生不同程度的猪高致病性蓝耳病疫情， 发病猪31． 3 万头， 死亡 8． 2 万头。该病给我国养猪业带来严重损失的同时， 导致猪肉价格飞涨， 增加人民生活成本， 影响社会稳定。为了解广东省高致病性猪蓝耳病的流行情况， 笔者进行了此次调查。

1材料与方法
1． 1材料
样本:无菌采集肺脏、 脾脏、 肾脏、 淋巴结 4 种组织。样本均来自于佛山科学技术学院动物医院临床疑似病料。仪器与试剂:高速冷冻离心机， ABI7500 荧光PCＲ 仪， 生物安全柜， 研钵， 微量可调移液器， 高致病性蓝耳病荧光 ＲT － PCＲ 检测试剂盒购自北京世纪元亨公司， DEPC 水， 其他试剂均为分析纯。
1． 2方法
1． 2． 1样本前处理
每份病料组织:分别从三个不同的位置称取样品约 1 g， 用手术剪剪碎混匀后取0． 05 g于研磨器中研磨， 加入 1． 5 mL 生理盐水继续研磨，待 匀 浆 后 转 至 1． 5 mL 灭 菌 离 心 管 中，8 000 r/min离心2 min， 取上清液100 μL 装入1． 5 mL灭菌离心管中。
1． 2． 2病毒 ＲNA 提取取已处理的样品、 阴性对照和阳性对照， 分别加入裂解液 600 μL， 充分颠倒混匀， 室温静置 3 ～5 min。将液体吸入吸附柱中(吸附柱要套上收集管， 吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质， 以免离心时堵塞吸附柱)， 13 000 r/min离心30 s。弃 去 收 集 管 中 液 体，加 入 600 μL 洗 液，13 000 r/min离心 30 s。重复上述操作。弃去收集管中液体， 13 000 r/min 空柱离心2 min， 以除去残留的洗涤液。将吸附柱移入新的 1． 5 mL 离心管中， 向柱中央加入洗脱液25 ～50 μL， 室温静置1 min， 13 000 r/min离心 30 s， 离心管中液体即为模板 ＲNA。

2 结果
2． 1不同地区高致病性猪蓝耳病检测结果(见表 1)
2． 2不同组织样本中高致病性猪蓝耳病检测结果
(见表 2）
2． 3不同猪种高致病性猪蓝耳病检测结果(见表 3）

3 讨论
    广东省夏季时间长， 较湿热， 气候条件决定了广东省成为高致病性猪蓝耳病的高发区。自实施强制免疫以来， 广东省高致病性猪蓝耳病疫情得到控制，但仍有零星发生。本研究采集临床送检病猪组织样本， 进行高致病性猪蓝耳病病原检测， 对广东省高致病性蓝耳病感染率进行一个初步的调查。从全省 10个地市临床组织样本中均检测到高致病性猪蓝耳病病毒， 总阳性率 28． 9%， 这说明高致病性猪蓝耳病在广东省流行范围大、 病原污染面广， 是养猪业的重大隐患， 各级政府和职能部门应高度重视。之所以没有暴发疫情， 说明国家的调控措施已初见成效， 现在高致病性猪蓝耳病的流行趋势为散发、 零星发生。本研究样品来自佛山科学技术学院动物医院， 由于是临床发病的猪， 所以阳性率较高。韩庆彦等对甘肃省健康猪群进行高致病性蓝耳病调查， 阳性率为 0． 54%， 感染率很低。高许雷等对 2008—2009年我国 5 省区屠宰场的 218 份样品进行了高致病性猪蓝耳病病毒 ＲT － PCＲ 检测， 结果表明， 屠宰场的检出率平均为 44%。杨泽林等对重庆市发病场的病猪组织进行检测， 发现抗原阳性率为 85． 01%， 远远高出广东省的阳性率。不同组织样品中， 以肺脏的阳性率最高， 达25． 8%;其次为肾脏， 阳性率为 20． 1%;淋巴结和脾脏分别为 17． 5% 和 15． 5%。结果表明， 在这几个组织器官中， 高致病性蓝耳病病毒感染猪以后， 最先侵袭的器官可能是肺脏， 然后是肾脏， 最后才是脾脏。而从不同猪群检测结果来看， 各猪群均可感染蓝耳病病毒， 其中保育猪阳性率最高， 最容易感染该病毒。杨泽林等研究发现， 仔猪对 HP － PＲＲSV 最敏感，其次是育肥猪， 与本研究结果略有不同猪高致病性蓝耳病疫情自 2006 年暴发以来， 在兽医科技人员和基层兽医技术员的共同努力下， 疫情得到了有效的控制， 但仍有零星发生。鉴于该病危害严重， 各级政府和职能部门仍不能掉以轻心， 要防止该病卷土重来。

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